Banquo é um dos comandantes do rei Duncan, companheiro de armas de Macbeth e pai de Fleance. Ouve as bruxas junto com Macbeth, recebe delas uma profecia só sua, a de que seus filhos serão reis, e acaba assassinado a mando do amigo.
Na charneca (Ato I, cena 3), as bruxas lhe dizem: "Filhos teus serão reis, embora tu não o sejas." Quando Ross e Angus confirmam que Macbeth virou Barão de Cawdor, Banquo avisa que "os instrumentos de Satã contam-nos verdades" para depois nos trair. Mais tarde, no Ato II, cena 1, Macbeth lhe diz que, se seguir seu conselho quando chegar a hora, receberá muita honra, e Banquo só aceita se não perder a honra, se o coração continuar sem culpa e se continuar um súdito leal.
No Ato III, cena 1, com Macbeth já rei, Banquo diz sozinho que "assusta-me a idéia de teres jogado sujo para tanto", mas espera que a profecia dos filhos reis também se cumpra. Macbeth, por sua vez, diz: "Nossos temores encontram fundas raízes na pessoa de Banquo." Na cena 3, Banquo é atacado na estrada por assassinos e morre depois de gritar: "Foge, meu bom Fleance, foge, foge, foge! Poderás me vingar." Fleance escapa.
Banquo continua na peça depois de morto. No banquete (Ato III, cena 4), Macbeth vê o fantasma dele sentado no lugar do próprio Macbeth, e os convidados não o veem. No Ato IV, cena 1, as bruxas mostram a Macbeth oito reis, e Banquo vem por último, com um espelho na mão, apontando os descendentes.